La columna CarboPac™ PA1: una solución potente para el análisis de carbohidratos en cromatografía iónica
La columna Thermo Scientific™ Dionex™ CarboPac™ PA1 ha sido diseñada específicamente para satisfacer las rigurosas necesidades analíticas de los químicos especializados en carbohidratos. Permite la separación de carbohidratos no derivados a pH alto, método que es posible gracias a la excepcional estabilidad de las columnas CarboPac en condiciones básicas. A diferencia de las columnas macroporosas, la CarboPac PA1 utiliza una resina microporosa que ofrece una mayor eficacia cromatográfica. Se distingue especialmente por su capacidad para separar mono-, disacáridos y algunos oligosacáridos, incluidos sus isómeros de posición, enlace o ramificación, así como polímeros homogéneos.
El mecanismo de separación se basa en la cromatografía de intercambio aniónico a pH alto (HPAE), combinada con la detección amperométrica pulsada (PAD). Esta técnica permite identificar los carbohidratos sin necesidad de derivatización previa, al tiempo que garantiza una mayor sensibilidad gracias a la detección electroquímica selectiva. La columna CarboPac PA1 está diseñada para funcionar en rangos de pH de 0 a 14, a temperaturas entre 4 y 60 °C, y puede soportar presiones de hasta 5000 psi, lo que garantiza su compatibilidad con los sistemas cromatográficos modernos.
Las aplicaciones típicas de CarboPac PA1 incluyen el análisis de azúcares en matrices alimentarias (zumos, melazas, etc.), la caracterización de glicoproteínas o la cuantificación de carbohidratos simples y complejos en mezclas biológicas. El rendimiento de la columna se valida mediante cromatogramas de referencia utilizando eluciones isocráticas de NaOH a 150-200 mM.
Para garantizar la longevidad y la reproducibilidad, es esencial seguir procedimientos estrictos de preparación de las muestras y los eluyentes. Solo deben utilizarse soluciones de hidróxido de sodio y acetato de sodio de calidad ultrapura, preparadas en agua desionizada (18,2 MΩ·cm) y desgasificadas al vacío. Las columnas deben protegerse con una columna de protección CarboPac PA1, que se puede sustituir más fácilmente en caso de contaminación.
