A coluna CarboPac™ PA1: uma solução poderosa para a análise de carboidratos em cromatografia iônica
A coluna Thermo Scientific™ Dionex™ CarboPac™ PA1 foi concebida especificamente para responder às rigorosas necessidades analíticas dos químicos especializados em hidratos de carbono. Permite a separação de hidratos de carbono não derivados a pH elevado, método possibilitado pela estabilidade excecional das colunas CarboPac em condições básicas. Ao contrário das colunas macroporosas, a CarboPac PA1 utiliza uma resina microporosa que oferece uma melhor eficácia cromatográfica. Destaca-se pela sua capacidade de separar mono-, dissacarídeos e alguns oligossacarídeos, incluindo os seus isómeros de posição, ligação ou ramificação, bem como polímeros homogéneos.
O mecanismo de separação baseia-se na cromatografia por troca de aniões em pH elevado (HPAE), associada à deteção amperométrica pulsada (PAD). Esta técnica permite identificar os hidratos de carbono sem necessidade de derivação prévia, garantindo uma maior sensibilidade graças a uma deteção eletroquímica seletiva. A coluna CarboPac PA1 foi concebida para funcionar em intervalos de pH de 0 a 14, a temperaturas entre 4 e 60 °C, e pode suportar pressões até 5000 psi, garantindo assim a compatibilidade com os sistemas cromatográficos modernos.
As aplicações típicas da CarboPac PA1 incluem a análise de açúcares em matrizes alimentares (sumos, melaços, etc.), a caracterização de glicoproteínas ou ainda a quantificação de hidratos de carbono simples e complexos em misturas biológicas. O desempenho da coluna é validado através de cromatogramas de referência utilizando eluições isocráticas de NaOH a 150–200 mM.
Para garantir a longevidade e a reprodutibilidade, é essencial respeitar procedimentos rigorosos de preparação de amostras e eluentes. Apenas devem ser utilizadas soluções de hidróxido de sódio e acetato de sódio de qualidade ultra pura, preparadas em água desionizada (18,2 MΩ·cm) e desgaseificadas sob vácuo. As colunas devem ser protegidas por uma coluna de guarda CarboPac PA1, mais facilmente substituível em caso de contaminação.
