La colonne CarboPac™ PA1 : Une solution puissante pour l’analyse des glucides en chromatographie ionique
La colonne Thermo Scientific™ Dionex™ CarboPac™ PA1 a été conçue spécifiquement pour répondre aux besoins analytiques rigoureux des chimistes spécialisés dans les glucides. Elle permet la séparation des glucides non dérivatisés à pH élevé, méthode rendue possible par la stabilité exceptionnelle des colonnes CarboPac à des conditions basiques. Contrairement aux colonnes macroporeuses, la CarboPac PA1 utilise une résine pelliculaire microporeuse qui offre une meilleure efficacité chromatographique. Elle se distingue notamment par sa capacité à séparer les mono-, disaccharides et certains oligosaccharides, y compris leurs isomères de position, de liaison ou de branchement, ainsi que des polymères homogènes.
Le mécanisme de séparation repose sur la chromatographie par échange d’anions à pH élevé (HPAE), associée à la détection ampérométrique pulsée (PAD). Cette technique permet d’identifier les glucides sans nécessiter de dérivatisation préalable, tout en assurant une sensibilité accrue grâce à une détection électrochimique sélective. La colonne CarboPac PA1 est conçue pour fonctionner dans des plages de pH allant de 0 à 14, à des températures comprises entre 4 et 60 °C, et peut supporter des pressions allant jusqu’à 5000 psi, garantissant ainsi une compatibilité avec les systèmes chromatographiques modernes.
Les applications types de la CarboPac PA1 incluent l’analyse des sucres dans des matrices alimentaires (jus, mélasses, etc.), la caractérisation de glycoprotéines, ou encore la quantification de glucides simples et complexes dans des mélanges biologiques. Les performances de la colonne sont validées à travers des chromatogrammes de référence utilisant des élutions isocratiques de NaOH à 150–200 mM.
Pour garantir la longévité et la reproductibilité, il est essentiel de respecter des procédures strictes de préparation des échantillons et des éluents. Seules des solutions de sodium hydroxyde et d'acétate de sodium de qualité ultra pure doivent être utilisées, préparées dans de l’eau désionisée (18,2 MΩ·cm), et dégazées sous vide. Les colonnes doivent être protégées par une colonne de garde CarboPac PA1, remplaçable plus facilement en cas de contamination.
